荧光素标记鬼笔环肽

荧光素标记鬼笔环肽简介

荧光素标记鬼笔环肽可用于特异性标记细胞骨架的 F-肌动蛋白（肌动蛋白丝）。它与许多不同种类的动植物中肌动蛋白丝的所有变体结合。通常，鬼笔环肽与荧光染料偶联使用。鬼笔环肽以高选择性结合F-肌动蛋白，而荧光素提供稳定和明亮的绿色荧光。

荧光素鬼笔环肽是DMSO中的1000×储备溶液，便于在甲*固定和透化组织切片，细胞培养或无细胞实验中标记，鉴定和定量F-肌动蛋白。

荧光素标记鬼笔环肽使用方法

1.制备1×荧光素鬼笔环肽工作溶液：

将 1 μL 1000×荧光环肽 DMSO 溶液加入 1 mL 含有 1% BSA 的 PBS 中。

注意：1. 不同的细胞类型可能有不同的染色方式。荧光素鬼笔环肽工作溶液的浓度应相应制备。

2. 1%牛血清白蛋白（BSA）用于减少非特异性背景染色。

2. 对细胞进行染色：

2.1 用PBS洗涤细胞2-3次。在室温下将细胞固定在PBS中的3.7%无甲醇甲*溶液中10-30分钟。

注意：避免使用任何含有固定剂的甲醇，因为甲醇会在固定过程中破坏肌动蛋白。优选的固定剂是无甲醇甲*。

2.2 在PBS中洗涤固定细胞2-3次。

2.3 可选：将 PBS 中的 0.1% Triton X-100 添加到固定电池中 3-5 分钟以增加渗透性。在PBS中洗涤细胞2-3次。

2.4将100μL/孔（96孔板）荧光素鬼笔环肽工作溶液加入固定细胞中，并在室温下将细胞染色20至90分钟。

2.5 用PBS轻轻冲洗细胞2-3次，以去除多余的荧光素鬼笔环肽。

2.6 在所需的Ex / Em波长（荧光素鬼笔环肽，Ex / Em = 497 / 516 nm）下运行荧光显微镜或其他设备。

注意事项及储存

1. 荧光标记鬼笔环肽的一个单位 (T) 的定义：按照推荐浓度，每次用量为 100 μL 染色工作液。

2.在 -20°C 避光，可稳定保存18 个月。避免冻融循环。