PolyFast 转染试剂

PolyFast 转染试剂产品简介

PolyFast 转染试剂由阳离子聚合物组成，可将核酸（DNA 或 RNA）引入真核细胞。在基于聚合物的转染中，外源性DNA与阳离子聚合物形成复合物，阳离子聚合物通过内吞作用进入宿主细胞。PolyFast 转染试剂可高效、低毒地转染多种细胞类型，包括一些难以转染的细胞。

PolyFast 转染试剂使用方法

1. 准备细胞

1.1 提前接种细胞，直到细胞转染的命性达到70-90%。

注意：转染前细胞的活力和总体健康状况会显著影响转染结果。细胞在转染前应至少存活90%，并且有足够的时间从传代中恢复。

1.2 取出介质。用PBS洗涤两次，然后将900μL无血清培养基加入6孔板的每个孔中。

2. 制备PolyFast 转染试剂/DNA 复合物

2.1 根据表 1，将 3 μL PolyFast 转染试剂与 50 μL 无血清培养基稀释至 6 孔板的每个孔中，并轻轻混合。在室温下孵育5分钟。

2.2根据表1，用1μL无血清培养基稀释50μgDNA，用于6孔板的每个孔并轻轻混合。在室温下孵育5分钟。

2.3 将稀释的PolyFast 转染试剂和 DNA 轻轻混合。在室温下孵育15分钟。

3. 向细胞中添加PolyFast 转染试剂/DNA 复合物

将PolyFast 转染试剂/DNA 复合物加入 6 孔板中的细胞中并充分混合。在 37°C 下孵育 24-48 小时。如有必要，可在 6 小时后用新鲜含血清的培养基替换培养基。

注意事项及储存

1.通常，DNA（μg）与PolyFast转染试剂（μL）的比例为1：3，必要时可在1：1至1：5的范围内优化转染效果。

2.RNA转染仅遵循DNA所述的方案。

3.转染时，应选用高纯度、无菌、无污染的 DNA/RNA。

4. 细胞状态会极大影响转染效率，待转染细胞应处于良好生长状态。

5.血清对 PolyFast 转染试剂/DNA 复合物的形成有一定影响，建议用无血清培养基稀释 PolyFast 转染试剂和 DNA。

6.转染过程中，抗生素的存在可能导致转染效率降低及细胞毒性，不建议在转染培养基中添加抗生素。

7.在-20°C下储存2年。避免重复的冻融。